Stołowa wirówka wolnoobrotowa do zamrażania jest używana w laboratorium do wstępnej separacji i ekstrakcji biologicznych makrocząsteczek, osadów itp. Jej obrotowa głowica jest wykonana głównie ze stopu aluminium, który jest płaski i kątowy. Rura odśrodkowa wykonana jest z twardego szkła, twardego plastiku polietylenowego i rury ze stali nierdzewnej. Wirówka wyposażona jest w silnik napędowy, timer, regulator (wskaźnik prędkości obrotowej) oraz układ chłodzenia (regulowany zakres temperatur - 20~40 ℃), który może zastąpić głowice obrotowe o różnych pojemnościach i różnych typach prędkości obrotowych w zależności od do potrzeb materiału odśrodkowego.
Szczegółowe etapy wirowania w celu ekstrakcji białek cytoplazmatycznych i jądrowych za pomocą wolnoobrotowej wirówki zamrażającej typu desktop:
1. Określ stan wzrostu komórek. Stan wzrostu komórek powinien wynosić 80% lub więcej:
2. Wirować przy 1500 obr./min przez 5 min
3. Odrzucić supernatant, przemyć komórki równą objętością zimnego PBS i powtórzyć 3 razy jak w kroku 2
4. Zgodnie z przewidywaną ilością opadów dodać 5-krotność objętości izotonicznego buforu sis do cząstek komórek, aby komórki delikatnie zawiesiły się i w miarę możliwości unikały pienienia
5. Dodaj bufor do lizy do zawieszonych komórek i umieść go w lodzie na 15 minut, aby umożliwić ekspansję komórek, co można sprawdzić pod mikroskopem
6. Do ekspandowanych komórek w eksperymencie komórkowym dodaj 10% IGEPALCA-630, aby stężenie końcowe osiągnęło 0,3%, dobrze wymieszaj i delikatnie dodaj
7. Natychmiast odwiruj (użyj probówki 1,5 ml EP przy 5500 obr./min przez 30 s w przypadku dużych ilości; użyj probówki 50 ml przy 5500 obr./min przez 2 min w przypadku dużych ilości)
8. Przenieś supernatant (białko cytoplazmatyczne) do nowej probówki do zamrażania
9. Zawiesić komórki z 5-krotną objętością zawieszonych cząstek w buforze izotonicznym i dobrze wymieszać
10. Odwirować zawiesinę komórek przy 1500 obr./min przez 5 min i usunąć supernatant
11. Zawiesić cząstki w 2/3 objętości buforu do ekstrakcji
12. Umieścić probówkę na mieszadle wibracyjnym, wstrząsnąć i mieszać przy 700 obr/min przez 15 min, a następnie przy 1400 obr/min przez 15 min. Cały proces należy uważać, aby uniknąć piany
13. Wirować przy 9400 obr./min przez 15 min, po odwirowaniu w niskiej temperaturze przenieść supernatant do nowej zamrożonej probówki wirówkowej
14. Podziel na kilka części i zamroź je ciekłym azotem i przechowuj (przechowywanie długoterminowe powinno wynosić -80 ℃, krótkotrwałe przechowywanie powinno wynosić -20 ℃)