1. Dodawanie próbek: Dodać rozcieńczoną próbkę do powlekanej płytki, rozcieńczyć surowicę w PBS lub soli fizjologicznej w stosunku 1:20, a następnie dodać 10 ul do studzienek reakcyjnych mikropłytki.

2. Dodatkowa kontrola: 3-dołkowa kontrola negatywna, 1-dołkowa kontrola pozytywna i 100 ul surowicy kontrolnej.

3. Inkubacja: Wstrząśnij płytką reakcyjną, aby dobrze wymieszać próbkę, a następnie umieść ją w inkubatorze lub łaźni wodnej o temperaturze 37°C na 20 minut.

4. Mycie podłóg: Rozcieńczyć 15 ml roztworu myjącego wodą destylowaną do 300 ml. Podczas mycia ręcznego zawartość płytki reakcyjnej należy wylać i umieścić w otworze wypełnionym płynem myjącym, a następnie odstawić na 30°C, aby mocno wstrząsnąć. Powtórz tę czynność 5 razy i ubij do sucha. Maszyna musi wykonać 5 razy. 200ul roztworu myjącego można wstrzyknąć do każdego dołka lub napełnić, a następnie pozostawić na 30 minut i osuszyć.

5. Dodać roztwór roboczy znakowany enzymem: Dodać 100 ul roztworu roboczego znakowanego enzymem do każdej studzienki w inkubatorze w temperaturze 37°C i po 20 minutach przemyć płytkę pięć razy. Płyta myjąca jest taka sama jak w kroku 4.

6. Jest to ostatni etap reakcji, z rozwojem barwy i zakończeniem reakcji: 50 ul substratu dodaje się do studzienki reakcyjnej i barwa rozwija się przez 10 minut w ciemności w temperaturze 37°C. Roztwór w każdej studzience zatrzymano i miesza się w celu zakończenia reakcji. Mikropłytki należy stosować w sterylnych warunkach. Ostrożnie zdezynfekuj i wyczyść płytki po użyciu, ale pamiętaj, że niektóre płytki wymagają uważnego przeczytania instrukcji, aby sprawdzić, czy można je sterylizować w wysokich temperaturach.